ELISA實(shí)驗(yàn):酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定原理與應(yīng)用方向
ELISA的原理和應(yīng)用方向其實(shí)很清晰,核心是利用抗原抗體的特異性結(jié)合和酶的高效催化來(lái)實(shí)現(xiàn)高靈敏度的檢測(cè)。下面天正信達(dá)幫你梳理一下:
一、ELISA基本原理
固相化?:將抗原或抗體固定在固相載體(如微孔板)表面,保持其免疫活性。
酶標(biāo)記?:將另一種抗體或抗原與酶(如辣根過(guò)氧化物酶HRP)連接,形成酶標(biāo)復(fù)合物,該復(fù)合物同時(shí)保留免疫活性和酶活性。
特異性結(jié)合?:加入待測(cè)樣本,樣本中的目標(biāo)物(抗原或抗體)與固相載體或酶標(biāo)復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合。
洗滌分離?:洗去未結(jié)合的物質(zhì),只留下特異性結(jié)合的復(fù)合物。
酶促顯色?:加入酶的底物,酶催化底物產(chǎn)生有色產(chǎn)物,顏色深淺與樣本中目標(biāo)物濃度成正比。
定量檢測(cè)?:用分光光度計(jì)測(cè)定顏色強(qiáng)度,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中目標(biāo)物的精確濃度。
二、ELISA應(yīng)用方向
ELISA應(yīng)用廣泛,主要包括:
疾病診斷?:檢測(cè)病原體或其抗體。
疾病監(jiān)測(cè)與普查?:大規(guī)模篩查疾病或檢測(cè)人群免疫水平。
法醫(yī)與獸醫(yī)檢測(cè)?:用于毒物檢測(cè)、動(dòng)物疫病診斷等。
農(nóng)業(yè)與植物病理學(xué)?:檢測(cè)植物病原體或轉(zhuǎn)基因成分。
科研與藥物開(kāi)發(fā)?:定量檢測(cè)細(xì)胞因子、激素、藥物等生物分子。
三、ELISA主要類型
間接法?:檢測(cè)抗體。抗原包被固相板,加入待測(cè)抗體,再用酶標(biāo)二抗檢測(cè)。
夾心法?:檢測(cè)大分子抗原。先包被捕獲抗體,加入樣本,再用酶標(biāo)檢測(cè)抗體。
競(jìng)爭(zhēng)法?:檢測(cè)小分子抗原或半抗原。樣本抗原與酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合固相抗體。
注意:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。
天津天正信達(dá)供應(yīng):RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒、提取試劑盒、色譜進(jìn)樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實(shí)驗(yàn)耗材,我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái),主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機(jī)、全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀、高速落地離心機(jī)和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。
電話
微信號(hào)